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如何區(qū)別激發(fā)光光譜儀和熒光光譜儀?

點擊次數(shù):3375 更新時間:2019-03-26

   熒光光譜儀是一種定性、定量分析的儀器。通過熒光光譜儀的檢測,可以獲得物質(zhì)的激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、量子產(chǎn)率、熒光強度、熒光壽命、斯托克斯位移、熒光偏振與去偏振特性,以及熒光的淬滅方面的信息。是研究藥物與蛋白質(zhì)相互作用的常用儀器。藥物與蛋白質(zhì)相互作用后可能引起藥物自身熒光光譜和蛋白質(zhì)自身熒光(內(nèi)源熒光)光譜以及同步熒光光譜的變化,如熒光強度和偏振度的改變、新熒光峰的出現(xiàn)等,這些均可以提供藥物與蛋白質(zhì)結(jié)合的信息。

 
  如何區(qū)別激發(fā)光光譜儀和熒光光譜儀?熒光往往很弱,如果不把它從激發(fā)光里分離出來,它會被激發(fā)光淹沒。熒光測量系統(tǒng),通常用以下一種或幾種方法來分離熒光:
 
  1、90°布置法:激發(fā)光和探測器90°方向布置。由于熒光沒有方向性,它向四周發(fā)射,因此可以把探測器放在與激發(fā)光成90°的位置來接收熒光。大部分的熒光測量裝置都采用此方法(同時常常配上其它方法)。
 
  2、時間延遲法:由產(chǎn)生熒光的原理可知,熒光從產(chǎn)生到消失,它有一個時間過程(即從高能級的非穩(wěn)態(tài)躍遷到低能級的亞穩(wěn)態(tài)或穩(wěn)態(tài)的時間)。不同的物質(zhì),這個時間的長短是不一樣的,它們從幾微秒到幾分鐘不等。我們可以給探測器的快門一個延遲時間,讓激發(fā)光消失后開始對熒光采樣。在一些特殊條件,如用反射探針測固體、液體的熒光時,光路無法90°布置,這時需要通過延遲采樣時間來分離出熒光。
 
  3、濾波法:從熒光光譜儀產(chǎn)生原理可知,熒光的波長大于激發(fā)光的波長。我們在探測器前面放一個長通濾波片,它的截至波長稍大于激發(fā)光波長。這樣,只有熒光才能被探測器采集。該法的另一個好處是可以慮掉一部分雜散光,但是它也可能慮掉一部分熒光。

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